中文字幕永久有效美腿-国产精品午夜福利片-日本香港久久久三级片-华人被黑人粗大猛然进

（1）間接ELISA（1ELISA）
我國現(xiàn)已建立了間接ELISA方法，但目前應(yīng)用還較少。間接ELISA試驗中，多是以光滑型脂多糖（sLPS）作為抗原的，這些方法大多已通過田間試驗并得到了驗證，并正在被廣泛應(yīng)用。lELISA高度敏感，但不能鑒別牛種布氏桿菌19號疫苗接種所產(chǎn)生的抗體。不同的間接ELISA試驗程序都比較相似，脂多糖抗原包被ELISA板，PBST洗滌后加入待檢血清，再依次加入酶標二抗、底物和終止液，用酶標儀測光密度值并判定結(jié)果。ELISA常用反應(yīng)率來判定結(jié)果，即樣品OD值／陽性對照OD值×100％。

間接ELISA在檢測感染牛時其敏感性等于或大于BBAT，在檢測未免疫的牛時其特異性與CFT相同。根據(jù)所設(shè)定的臨界值不同，在檢測免疫牛時其特異性可能會低于CFT。

（2）競爭ELISA
我國目前還未見有布氏桿菌病競爭ELISA試驗的報道。該方法應(yīng)用了單克隆抗體，其特異性明顯高于間接ELISA。競爭ELISA可以排除牛種布氏桿菌19號疫苗所產(chǎn)生抗體的影響。其試驗程序首先為包被脂多糖抗原，PBST洗滌后加入單克隆抗體（M84），再立即加入待檢血清，溫育后再加入酶標羊抗鼠IgG，然后依次加入底物和終止液，用酶標儀測光密度值并判定結(jié)果。其結(jié)果常采用反應(yīng)率來判定。

競爭ELISA在檢測感染牛時其敏感性等于或大于凝集試驗，與間接ELISA相當。在檢測未免疫牛時，其特異性等于或大于CFT和間接ELISA。在檢測牛種布氏桿菌”號近期免疫牛時，其特異性會低一些．但在檢測過往免疫動物時，其特異性要顯著升高。