主要試劑:
愈創(chuàng)木酚(分析純),丁二酸, NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液。
底物的配制:137.4μl愈創(chuàng)木酚(分析純)與4.5g丁二酸混合, 用NaOH溶液調(diào)PH至4.5,用蒸餾水定容至1L 。
主要儀器:
⑴UV - 2100 型紫外 - 可見分光光度計(jì);
⑵DELTA 320型 pH計(jì)。
試驗(yàn)方法:
1 將酶液以需要的倍數(shù)進(jìn)行稀釋。
取2.4ml底物,加0.6ml酶液,混勻,30度反應(yīng)30min。
2 在465納米下測(cè)其吸光值。
計(jì)算公式:
酶活(U/L)= A×n×13.89
A吸光度值 n稀釋倍數(shù) 13.89系數(shù)
定義:
一分鐘內(nèi)氧化1μmol 愈創(chuàng)木酚所需的酶量為1個(gè)酶活單位(U)。
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