為了保證ELISA試劑盒試驗(yàn)的穩(wěn)定及順利完成,下面通蔚生物給大家講解使用洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)注意以下三個(gè)步驟。
1、洗滌參數(shù)
主要的參數(shù)是洗滌量。自動(dòng)洗板機(jī)會(huì)分配洗滌液。如果你之前遭遇過(guò)高背景,那么不要猶豫,將洗滌量調(diào)為高,比包被體積更高。太少的洗滌液會(huì)讓一部分分析表面洗滌不到,從而明顯增加背景。所有反應(yīng)孔的洗滌量必須相同。
ELISA試劑盒的使用手冊(cè)中列出包被量。我們建議使用350µl洗滌液進(jìn)行洗滌,以便清潔整個(gè)反應(yīng)孔的壁。一般來(lái)說(shuō),洗滌量越高,則孵育步驟殘留的抗體或抗原量就越少。
2、抽 吸
還有一些參數(shù)會(huì)影響洗滌步驟的效果。這些參數(shù)包括吸液高度和吸入位置,這兩者都能調(diào)整,以降低背景(殘留量)和差異。
殘留液體中包含未結(jié)合的抗原或抗體,它們會(huì)增加背景信號(hào)。殘留量越小,殘留液體越少,轉(zhuǎn)移到下一步的干擾液體也就越少。
吸液高度會(huì)明顯影響殘留量;如果洗滌吸頭與反應(yīng)孔底部的距離稍大,那就會(huì)讓殘留量急劇增加。反之,如果洗滌吸頭壓著反應(yīng)孔底部,那么也會(huì)使吸液效率降低,殘留量增加。
3、洗滌次數(shù)
影響洗滌效果的主要參數(shù)是洗滌循環(huán)的量。當(dāng)然,洗滌次數(shù)越多,背景越低。然而,太多次的洗滌會(huì)降低信號(hào)強(qiáng)度,使其難以測(cè)定。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復(fù)洗滌三次。不過(guò),一般而言,包被平板需要的洗滌次數(shù)比用戶包被的平板要少。對(duì)于用戶包被的ELISA板,必須優(yōu)化洗滌次數(shù)。
控制洗滌量和洗滌次數(shù)的另一種方法是加入過(guò)量的洗滌液。一般來(lái)說(shuō),96孔板的每個(gè)孔能容納330至460 µl。不過(guò),有些自動(dòng)化洗板機(jī)可設(shè)置程序,分配遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出這個(gè)量的洗滌液,比如1 ml。它是如何做到的呢?其實(shí)很簡(jiǎn)單,就是在分液的同時(shí)打開吸液功能。換句話說(shuō),隨著分液器分配更多的液體,抽吸器也將液體吸出。這種技術(shù)能增加洗滌量,但不會(huì)溢出到其他孔中。
以上是通蔚生物ELISA試劑盒試驗(yàn)洗板機(jī)洗板的具體步驟有那些,希望可以幫助大家。上海通蔚生物倉(cāng)鼠elisa試劑盒一路走來(lái)依靠豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫(kù)存、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間、競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格的優(yōu)勢(shì)等獲得各大學(xué)院機(jī)構(gòu)的支持和信任。我們?cè)谌蘸蟛徽撌卿N售部門、技術(shù)部門還是行政部門都要不斷壯大,虛心學(xué)習(xí),集思廣益,事無(wú)具細(xì)的為客戶所想,急客戶所急。讓客戶滿意,才是我們永恒的追求!
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